Dünnschicht-Chromatographie
Dünnschichtchromatographie (TLC) ist eine sehr häufig verwendete Technik, die in der synthetischen Chemie zur Identifizierung von Verbindungen, ihre Reinheit zu bestimmen und nach dem Fortschreiten einer Reaktion. Es ermöglicht auch die Optimierung des Lösungsmittelsystems für ein Trennproblem gegeben. Im Vergleich mit Säulenchromatographie, es erfordert nur geringe Mengen der Verbindung (
ng) und ist viel schneller als gut.
Als stationäre Phase eine spezielle Matrix fein gemahlenes (Kieselgel, Aluminiumoxid oder ähnlichem Material) auf eine Glasplatte beschichtet ist, ein Metall oder eine Kunststofffolie als dünne Schicht (
0,25 mm). Zusätzlich wird ein Bindemittel wie Gips in die stationäre Phase gemischt, um sie auf den Objektträger besser haften. In vielen Fällen wird ein Leuchtstoffpulver in die stationäre Phase gemischt später auf die Visualisierung zu vereinfachen (beispielsweise leuchtend grün, wenn man es bis 254 nm UV-Licht belichten).
Vorbereiten der Platte
berühren Sie die DC-Platte nicht auf der Seite mit der weißen Fläche. Um eine imaginäre Startlinie, bildet zwei Kerben auf jeder Seite der DC-Platte zu erhalten. Sie können auch eine dünne Linie mit Bleistift zeichnen. Nicht Stift verwenden. Warum? Die Startlinie sollte 0,5-1 cm von der Unterseite der Platte sein.
Zeigen mit einem Schmelzpunkt Kapillare und in dem dunkelblauen Teil der Bunsenbrennerflamme. Halten Sie es dort, bis es weich wird und wird schlaffer. Schnell den Kapillare von der Flamme entfernen und zu etwa 2-3 mal seiner ursprünglichen Länge an den beiden Enden ziehen. Wenn Sie die Kapillare im Inneren der Flamme ziehen, haben Sie ein „Kunstwerk“, aber kein gutes Spotter. Lassen Sie die Kapillare abkühlen, und dann brechen sie in der Mitte. Stellen Sie sicher, dass Sie das geschlossene Ende auf einem von ihnen brechen. Keine Handschuhe verwenden, wenn Sie Kapillaren ziehen. Sie werden ohne sie viel bessere Kontrolle haben!
Film anschauen, wie Kapillaren ziehen hier hier
Spek die Platte
Das dünne Ende des Spotter wird in der verdünnten Lösung eingebracht; die Lösung wird in der Kapillare (Kapillarkräfte) steigen. Tippen Sie auf die Platte kurz an der Startlinie. Das Lösungsmittel am gleichen Ort zu verdampfen und wieder zu erkennen. Auf diese Weise erhalten Sie einen konzentrierten und kleinen Fleck bekommen. Versuchen Sie zu vermeiden, dass zu viel Material Spek, da dies die Qualität der Trennung wesentlich verschlechtern (# 145; Tailing # 146;). Die Spots sollten von den Rändern weit genug entfernt sein und von jedem als auch andere. Wenn möglich, sollten Sie die Verbindung oder das Gemisch zusammen mit den Ausgangsmaterialien und Zwischenprodukte möglich auf der Platte erkennen. Sie werden als interne Referenz dienen, da jede DC-Platte ist etwas anders.
Die Entwicklung einer Platte
Eine DC-Platte kann in einem Becherglas oder geschlossenen Gefäß (siehe Bild) entwickelt werden. Eine kleine Menge des Lösungsmittels (= mobile Phase) in dem Behälter. Das Lösungsmittel Pegel unter der Startlinie der TLC, sonst werden die Flecken lösen sich weg sein. Der untere Rand der Platte wird dann in einem Lösungsmittel getaucht. Das Lösungsmittel (Eluens) Reist die Matrix durch Kapillarität auf, die Komponenten der Proben bei verschiedenen Raten aufgrund der unterschiedlichen Grade der Wechselwirkung mit der Matrix (= stationäre Phase) und die Löslichkeit in dem Entwicklungslösungsmittel bewegt. Unpolare Lösungsmittel zwingen unpolare Verbindungen zur Oberseite der Platte, weil die Verbindungen gut lösen und nicht mit der polaren stationären Phase in Wechselwirkung treten. Das Lösungsmittel, die Platte zu reisen, bis
Die Komponenten, sichtbar als getrennte Flecken, werden durch Vergleich der Abstände sie mit denen der bekannten Referenzmaterialien gereist sind, identifiziert. Den Abstand von der Startlinie zu der Lösungsmittelfront (= d). Dann misst die Entfernung der Mitte des Flecks auf die Startlinie (= a). Unterteilen den Abstand des Lösungsmittels durch den Abstand der einzelnen Spot bewegt bewegt. Das resultierende Verhältnis Rf-Wert genannt. Der Wert zwischen 0,0 sein sollte (spot nicht von der Startlinie bewegt) und 1,0 (spot bewegte sich mit Lösungsmittelfront) und ist ohne Einheit.
Der Rf (= Retardationsfaktor) hängt von den folgenden Parametern:
- Lösungsmittelsystem,
- Absorptionsmittel (Korngröße, Wassergehalt, Dicke)
- Menge an Material gesichtet
- Temperatur
Aufgrund der Tatsache, dass alle diese Variablen nur schwer konstant zu halten, wird eine Referenzverbindung in der Regel auf die Platte als auch angewandt.