SolCalc Hilfe Diluting Proteinlösung

4.1. Wie eine Protein-Stammlösung verdünnen?

Rinderserumalbumin (BSA) ist eine einzelne Polypeptidkette, die aus etwa 583 Aminosäureresten und keine Kohlenhydrate. Bei pH 5-7 enthält 17 Disulfidbrücken und 1 Sulfhydrylgruppe. Theoretische BSA relative Molekülmasse von Aminosäuresequenz ist 66 399. Albumin ist eines der am umfangreichsten verwendeten Proteine ​​in biologischer Forschung heute. Es wirkt als starkes Antioxidans in der Zellkultur.

Um eine Standardkurve der Proteinkonzentration gegen die Extinktion bei 595 nm wird eine Reihe von Verdünnungen der BSA-Protein-Standard-Stammlösung zu messen und plotten ist, hergestellt werden. Stammlösungen verwendet werden, die Vorbereitungszeit zu sparen, sparen Materialien, Speicherplatz zu reduzieren und verbessern die Genauigkeit, mit der Arbeits geringere Konzentration Lösungen hergestellt werden. Der einfachste Weg für das Volumen der Protein-Stammlösung zu lösen für jede Verdünnung erforderlich ist, um die Formel C1V1 = C2V2 zu verwenden.

Problem: in einer Eichkurve, die durch die mittlere Absorption für jede Standardkonzentration gegen das Zielproteinkonzentration aufgetragen ist. Die Konzentration der Stammlösung (c1) 100 mg / L, und das Volumen der verdünnten Probe wird mit 2 ml (V2) fixiert. Proteinstandards sollten in dem gleichen Puffer hergestellt werden, wie die Proben untersucht werden. Eine bequeme Standardkurve kann mit Konzentrationen von 0, 10, 20, 30, 40, 50 mg / L unter Verwendung von Rinderserumalbumin hergestellt werden.

Unter Berufung auf diese Seite: