Wie man Karbolfuchsinlösung machen
Bereiten Sie die Karbolfuchsin Fleck durch die folgenden 2 Lösungen zu vermischen.
Lösung A: 0,2 g basisches Fuchsin und 10 ml 95% igem Ethanol.
Lösung B: 5 g Phenol und 90 ml destilliertem Wasser.
- Wählen Larven und / oder Puppen Anzeichen der europäischen foulbrood und legen sie auf einem Objektträger.
- Mit einem Tupfer oder Stick, Zellstoff- die Larven zusammen und die Folie verteilen überschüssige aus einem Ende drückt, eine dünne Schicht zu verlassen.
Lassen Sie die Ausstriche vor der Verarbeitung, um zu trocknen. - Wärme fix durch die Folie über einen Brenner ein paar Mal flammend
- Flood mit 0,2% Carbolfuchsin für 30 Sekunden.
- Wasche den Fleck und entweder Luft trocknen off oder sanft abtrocknen, bevor eine mikroskopische Untersuchung bei 1000-facher Vergrößerung.
Eine Diagnose der europäischen foulbrood wird, wenn Prüfung M. plutonius -artigen Organismen offenbart. Organismen werden als M. sein plutonius wenn sie lanceolate Kokken, etwa 0,5 x 1,0 um. E. faecalis ist sehr wie M. plutonius in Erscheinung und wurde als das verursachende Agens häufig verwechselt (Bailey and Gibbs 1962; Hornitzky und Wilson, 1989) (Figuren 5 a, b, c).
Eine Alternative zum Karbolfuchsin Fleck 0,2% ist die Gram-Färbung, nützlich vor allem, wenn die Gram-positive Eigenschaft von M. plutonius bestätigt werden muss.
Abb 5. a) Frühe Infektion. Nur Melissococcus plutonius. Der Pfeil zeigt eine Masse von kokkoid / lanceolate M. plutonius Organismen. b) Infiltration von sekundärem Invader Paenibacillus alvei. Der Pfeil zeigt eine der vielen vegetativen P. alvei Zellen. c) Proliferation von P. alvei Sporen auf den virtuellen Ausschluß von M. plutonius. Der Pfeil zeigt eine der vielen P. alvei Sporen. Fotos: Michael Hornitzky.