Blut-Agar Zusammensetzung, Herstellung, Verwendung und Arten von Hämolyse

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Blutagar ist eine angereicherte. Bakterienwachstumsmedium. Anspruchsvolle Organismen, wie Streptokokken, wachsen nicht gut auf normalen Wachstumsmedien. Blutagar ist eine Art von Wachstumsmedium (Trypticase-Soja-Agar mit 5% Schafblut angereichert), die das Wachstum von Bakterien, wie Streptokokken fördert, die sonst nicht wachsen.

Blut enthält Inhibitoren für bestimmte Bakterien, wie Neisseria und Haemophilus Gattungen und das Blutagar müssen diese Inhibitoren zu inaktivieren erhitzt werden und wesentlichen Wachstumsfaktoren freizugeben (z.B. V-Faktor). Heizung von Blutagar wandelt sie in Schokolade-Agar (erhitztes Blut verwandelt eine Schokolade Farbe) und unterstützt das Wachstum dieser Bakterien.

Blut-Agar besteht aus einer Basis mit einer Proteinquelle enthält (z.B. Tryptone), Sojabohnenprotein verdaut, Natriumchlorid (NaCl), Agar und 5% Schafsblut.

Zusammensetzung von Blut-Agar:

  • Pancreatic abgebautes Casein
  • Papainisch Spaltung von Sojaschrot
  • NaCl
  • Agar
  • Destilliertes Wasser

Kombinieren Sie die Zutaten und den pH-Wert auf 7,3. Kochen Sie das Agar lösen und durch Autoklavieren sterilisieren.

Verfahren zur Herstellung von Blutagar

Qualitätskontrolle von Blutagar

  1. Der pH-Wert des Blutes Agar Bereich von 7,2 bis 7,6 bei Raumtemperatur.
  2. Impfen die Platten mit 5 Stunden Bouillonkulturen von Streptococcus pyogenes und S. pneumoniae. Inokulieren auch eine Platte mit H. influenzae und Strähne mit S. aureus (d.h. Satellitismus Test).
  3. Inkubiere die Platten in einer Kohlendioxid-angereicherten Atmosphäre bei 35-37 ° C über Nacht.
  4. Prüfen Sie, ob die Wachstumseigenschaften der einzelnen Arten
    1. S. pyogenes. Beta-Hämolyse
    2. S. pneumoniae. Alpha-Hämolyse
    3. Satellitismus von H. influenzae

    Verwendet von Blut-Agar:

    Blut-Agar hat zwei Hauptanwendungen:

    1. Isolierung, Identifizierung (mit der Verwendung von entweder Optochin Scheiben- oder Bacitracin Scheibe und Testen der Empfindlichkeit des Isolats) und antimikrobielle Suszeptibilität von Streptococci.
    2. Bestimmen Sie die Art der Hämolyse, falls vorhanden.

    Blutagar und Hämolyse

    Bestimmte Bakterienarten produzieren extrazelluläre Enzyme, die Lyse der roten Blutzellen im Blut-Agar (Hämolyse). Diese Hämolysin (extotoxin) diffundiert radial nach außen von der Kolonie (oder Kolonien) verursacht eine vollständige oder teilweise Zerstörung der roten Blutkörperchen (RBC) in dem Medium und eine vollständige Denaturierung des Hämoglobins innerhalb der Zellen zu farblosen Produkten.

    Vier Arten von Hämolyse sind in Schafsblutagarplatte durch Streptokokken nämlich erzeugt; Alpha Hämolyse, Hämolyse Beta, Gamma und Alpha-prime Hämolyse oder breite Zone alpha Hämolyse.

    Die Hämolyse wird am besten beobachtet von Kolonien gewachsen unter anaeroben Bedingungen oder Inspektion unterirdische Kolonien zu untersuchen.

    Wie weiß man, wenn die Kolonien sie auf einer Platte beobachten Alpha Hämolyse oder Beta-Hämolyse verursacht haben?

    Hinweis: Um die Art von Blut-Agar-Hämolyse zu wissen, muss die Blut-Agar-Platte mit einer Lichtquelle gehalten werden und mit dem Licht beobachtet von hinten kommenden (Durchlicht).

    Wenn eine Art von Hämolyse vorhanden ist, dann wird man eine Zone der Hämolyse umgibt eine wachsende Kolonie beobachten.

    1. Alpha Hämolyse: Partielle Lyse der RBC eine grünlich-graue oder braune Verfärbung um die Kolonie zu produzieren. α Hämolyse beruht auf der Reduktion von RBC Hämoglobin zu Methämoglobin in dem Medium, um die Kolonie umgibt. Viele der Alpha-hämolytische Streptokokken sind Teil der normalen Körperflora. Aber Streptococcus pneumonia e, die auch alpha hämolytisch ist verursacht schwere Lungenentzündung und andere tödliche Infektionskrankheit.

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