Die Verwendung von selektiven und differentiellen Medien
VERWENDUNG VON UND DIFFERENTIAL MEDIA SELEKTIVES
Viele verschiedene Arten von Medien werden im mikrobiologischen Labor eingesetzt. Im Allgemeinen können diese Medien in mehrere Kategorien unterteilt werden, einschließlich nutritive, Differential, und selektiv.
Nährmedien werden als Medientypen definiert, die das Wachstum eines breiten Spektrums von Mikroorganismen unterstützen. Diese Arten sind in der Regel nicht-selektive betrachtet aufgrund der Tatsache, dass sie die meisten Organismen wachsen werden. Beispiele für Nährmedien umfassen tryptischen Soja-Agar, Nährstoff-Agar und Blut-Agar.
Differenzierungsmedium Typen sind solche, die von Mikroorganismen voneinander basierend auf Wachstumseigenschaften evident unterscheiden, wenn auf bestimmte Medientypen gezüchtet. Organismen mit unterschiedlichen Wachstumseigenschaften zeigen typischerweise sichtbare Unterschiede im Wachstum, wenn sie auf Differential Medien platziert. Beispiele hierfür sind Blut-Agar, Eosin Methylenblau (EMB) Agar, Mannit-Salz-Agar und MacConkey Agar.
Selektivmedium Typen sind so formuliert, um das Wachstum von einer Gruppe von Organismen zu unterstützen, aber das Wachstum eines anderen hemmen. Diese Medien enthalten antimikrobielle Substanzen, Farbstoffe oder Alkohol, um das Wachstum der Organismen zu hemmen, nicht für das Studium ausgerichtet. Selective Medientypen umfassen EMB-Agar, Mannit-Salz-Agar, MacConkey Agar und Phenylethylalkohol (PEA) Agar.
Eosin-Methylenblau-Agar (EMB-Agar) enthält die Farbstoffe Eosin und Methylenblau. Sie hemmen grampositive Organismen. Ein solches Medium ist selektiv für Gram-negative Spezies. Lactose-fermentierenden Organismen, wie E. coli produzieren einen schwarzen Niederschlag auf EMB. Ihre Kolonien werden entweder schwarz oder besitzen dunkele Zentren mit transparenten, farblosen Peripherien sein. Nicht-Laktose Fermentern wie Proteus sp. Salmonella sp. oder Shigella sp. erscheinen rosa oder ungefärbt. Somit wird das Medium als Differential mit Bezug auf Lactosefermentation.
Macconkey-Agar ist ähnlich Agar EMB, dass sie auch selektiv für gramnegative Spezies und Differential mit Bezug auf Lactosefermentation ist. MacConkey-Agar zum Nachweis von Coliformen und magensaftresistenten Erregern auf Basis ihrer Fähigkeit verwendet, Lactose zu fermentieren. Lactose-fermentierenden Bakterien erscheinen rot bis rosa, während Nicht-Lactose fermentierenden Bakterien als farblose oder transparente Kolonien erscheinen.
Mannit-Salz-Agar (7,5% NaCl) ist ein Medium selektiv für Staphylokokken und differentiell zu Mannit Gärung. Wachstum der meisten anderen Bakterien als Staphylokokken, die halophilen sind, wird durch die hohe Salzkonzentration im Medium gehemmt. Fermentation von Mannitol wird nur in der pathogenen Spezies von Staphylococcos gesehen und wird durch die Herstellung von sauren Produkten führenden Phenolrot in den Medien signalisiert von einem neutralen Rot-Orange nach Hellgelb zu ändern. Nicht-pathogenen Staphylokokken produzieren kleine durch rote oder lila pink- Zonen aufgrund der Erzeugung von Basis von Produkten umgeben Kolonien aufgrund Stoffwechsel.
Phenylethylalkohol (PEA) Agar ist ein selektives Medium, das das Wachstum der meisten gramnegativen Organismen hemmt. Phenylethylalkohol wirkt Lipidstruktur in der Membran von Gram-negativen Organismen sowie die Hemmung der Proteinsynthese, was zu einer schlechten Wachstum dieser Organismen auf dem Medium zu stören. Das Wachstum von gramnegativen Organismen auf diesem Medium neigt dazu, verkümmert oder vollständig gestoppt zu werden.
Blutagar (5% Schafsblut TSA-Platten) ist ein Nährmedium mit Differentialeigenschaften in Bezug auf die Hämolyse. Hämolyse ist die Zerstörung der Erythrozyten (rote Blutkörperchen). Das Ausmaß, in dem die Erythrozyten zerstört werden, kann durch die Auswirkungen der hämolytischen Enzyme auf den Zellen im Medium erkannt werden. Vollständiger Zusammenbruch des roten Blutkörperchen ist beta (β) Hämolyse bezeichnet und wird durch das Löschen um die Kolonien Schaffung die Hämolysin anerkannt. Teilweise Zerstörung der roten Blutkörperchen führt zu einer grünlich-braune Farbe auf dem Agar und alpha (α) Hämolyse bezeichnet. Gamma (γ) Hämolyse ist in der Regel der Begriff auf Wachstum auf Blutagar angewendet, die keine Schädigung der roten Blutkörperchen und keine Änderung in dem Medium verursacht.
Erster Teil: Selektive und Differentielle Medien
Jede Tabellengruppe müssen die folgenden
2 EMB-Agarplatten
2 MacConkey-Agar-Platten
2 Mannit-Salz-Agar-Platte
2 PEA Agarplatten
Kulturen der folgenden Organismen werden zur Verfügung gestellt: