Toluidinblaufärbung Protokoll für die Mastzellen
Toluidinblaufärbung Protokoll für die Mastzellen
Beschreibung: Mastzellen sind im Bindegewebe gefunden und deren Zytoplasma enthält Granulate (metachromatischen), bestehend aus Heparin und Histamin. Toluidinblau sollte Mastzellen rot-lila Fleck (Metachromatische Färbung) und den Hintergrund blau (orthochromatischen Färbung). Metachromasie, Elemente Gewebe eine andere Farbe aus der Farbstofflösung Anfärben, ist aufgrund der pH-Wert, Farbstoffkonzentration und die Temperatur des basischen Farbstoffes. Blaue oder violette Farbstoffe werden eine rote Farbverschiebung zeigen, und rote Farbstoffe, die eine gelbe Farbverschiebung mit Metachromatische Gewebselementen zeigen.
Fixation: 10% Formalin.
Lösungen und Reagenzien:
Toluidinblau Stammlösung:
Toluidinblau O (Sigma) --------------- 1 g
Mischen Sie zu lösen.
Natriumchlorid (1%):
Mischen Sie aufzulösen (machen diese Lösung frisch jedes Mal). Der pH-Wert auf 2,0
2.5 unter Verwendung von Eisessig oder HCl.
Toluidinblau Arbeitslösung (pH-Wert 2,0
3. Waschen in destilliertem Wasser, 3 ändert.
4. Entwässern schnell durch 95% und 2 ändert sich von 100% Alkohol (10 Dips da jeder Fleck schnell verblasst in Alkohol).
5. Löschen in Xylol oder Xylol-Ersatzstoff, 2 ändert, je 3 Minuten.
6. Coverslip mit harzigem Befestigungsmedium.