DNA-Bibliotheken - Erzeugen von cDNA (Video), Khan Academy
- [Voice-over] In Ordnung, so # x27 lassen; s sagen, dass Sie # x27; ve diesen kleinen Kerl bekam hier und er # x27; s bekam seine Schuhe und er # x27; s gerade glücklich, smilin # x27 ;. So richtig dieser Kerl hier ist unser Protein. Also, lassen Sie # x27; s an, wie dieses Protein erstellt wurde. Also, um Protein zu machen haben wir mit unserer Basis zu beginnen, und in diesem Fall unsere Basis ist DNA. > Von DNA wir Boten-RNA zu erzeugen, dann der Boten-RNA führt schließlich zur Bildung eines Proteins. Und Protein ist dieser glückliche Kerl hier. Das ist ziemlich einfach, aber was passiert, wenn wir wollten, in umgekehrter Richtung gehen? Was passiert, wenn wir mit einem Protein begann und das wollten wir herausfinden, was war seine DNA-Sequenz? Also, wenn wir in diese Richtung gehen wollte. So # x27 lassen; s schauen, wie das gemacht wird. Nun dachten die Wissenschaftler, dass es schön wäre grundsätzlich in der Lage sein, den Namen jedes Protein zu geben, dass sie # x27; re interessiert und automatisch wäre es mit der DNA-Sequenz dieses Proteins Pop-up. Nun wird die als DNA-Bibliothek bekannt. Und eine DNA-Bibliothek wäre für die Forscher von Vorteil sein, und die Wissenschaftler und Kliniker. Also, lassen Sie # x27; s schauen, wie das gemacht wird. Also, wir # x27; ll beginnen mit unserem Protein und unser Protein ist im Grunde eine Kette von Aminosäuren. Also, im Grunde Aminosäuren ist aus Boten-RNA gebildet. Wenn wir also die Aminosäuresequenz des Proteins wissen wir wissen, was die Boten-RNA-Sequenz auf der Codon-Tabelle basiert, dass wir alle mit allzu vertraut sind. Also, wenn wir die Boten-RNA-Sequenz haben, was wir tun, ist, dass wir ein Enzym bekannt Reverse-Transkriptase hinzufügen und wenn wir Reverse-Transkriptase hinzufügen, im Grunde nimmt diese Boten-RNA und macht eine komplementäre DNA-Sequenz an den Boten-RNA. Und die # x27; s als cDNA bekannt, die # X27; c # x27; steht für die Gäste kostenlos. So komplementärer DNA, eine Sache im Auge zu behalten ist, einzelsträngige DNA. Also, normalerweise DNA in unseren Zellen ist doppelsträngige DNA, aber komplementärer DNA einzelsträngig ist. Also, um doppelsträngige DNA zu erzeugen, müssen wir ein weiteres Enzym hinzuzufügen, wie DNA-Polymerase bekannt. DNA polyermase erzeugt grundsätzlich doppelsträngige DNA. Dies ist also im Grunde einer der Verfahrensschritt der Erstellung einer DNA-Bibliothek. Also das ist der erste Schritt, jetzt # x27 lassen; s Blick auf Schritt zwei. So, jetzt, dass wir unsere doppelsträngige DNA haben, was wir brauchen ist zu tun Sequenz es. Also, um es zu sequenzieren we # x27; ll mit unserer doppelsträngige DNA beginnen und wir # x27; ll im Grunde injizieren sie in eine Art Klonierungsvektor, wie ein plasmate oder einen Virus. Klonierungsvektor, und dass Klonierungsvektor kann dann sein, dann können Sie diesen Klonierungsvektor nehmen, und fügen Sie einige Bakterien. Und it # x27; ll im Wesentlichen die Bakterien infizieren und die Bakterien werden im Allgemeinen sehr viele dieser DNA produzieren, diese doppelsträngige DNA, so dass # x27; s ein Prozess als Amplification bekannt. Und wenn wir eine Menge doppelsträngiger DNA haben wir # x27; ll gehen und Sequenz, die doppelsträngige DNA und im Grunde, sobald wir haben diese Sequenz wir # x27; ll die Sequenz in eine große Datenbank, die # x27 setzen; s leicht zugänglich online und die Datenbank wird im Grunde die DNA-Bibliothek füllen. So, nun jemand, der in der DNA-Sequenz eines bestimmten Proteins interessiert ist, kann nur in diese Bibliothek gehen, und ziehen Sie die genetische Sequenz des Proteins von Interesse auf.
Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
DNA-Klonierung und rekombinante DNA
DNA-Klonierung und rekombinante DNA